San Bartolomé, girado hacia su lado izquierdo, representa una de las variaciones más impactantes, si no decir que única, en el apostolado de El Greco, sustituyendo a San Lucas, vemos representado un santo vestido con túnica y manto blancos, tal y como se le describe en la "Leyenda Dorada", de rostro pálido y demacrado, con cabellos y barba oscuros y revueltos.
Porta en su mano derecha el cuchillo, símbolo con el que representa que murió desollado vivo, mientras que con su mano izquierda sujeta la cadena con la que lleva atado a un diablo.